HEK293T/17-Zellen
Allgemeine Informationen
Beschreibung | 293T/17, auch bekannt als HEK 293T/17, ist eine Variante der 293T-Zelllinie. Das temperaturempfindliche SV40 T-Antigen-Gen wurde in 293T-Zellen eingefügt, um sie hoch transfizierbar zu machen. Durch Klonen und Testen mit pBND- und pZAP-Vektoren wurde ein spezifischer Klon, 17, aufgrund seiner Fähigkeit, hohe Mengen infektiöser Retroviren zu produzieren, ausgewählt, was zur Schaffung der Zelllinie 293T/17 führte. Die Eigenschaft, das große T-Antigen des Simian-Virus 40 konstant zu exprimieren, macht die 293T/17-Zellen zu einer hervorragenden Wahl für Transfektionsexperimente. |
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Organismus | Menschen |
Gewebe | Embryonale Niere |
Anwendungen | Diese Zelllinie ist eine optimale Wahl für Transfektion, Hochdurchsatz-Screening, Toxikologie und Impfstoffentwicklung. |
Synonyme | HEK293T/17, HEK-293T/17, HEK 293T/17 |
Merkmale
Alter | Fötus |
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Geschlecht | Weiblich |
Morphologie | Epithelial |
Wachstumseigenschaften | Adhärent |
Identifikatoren / Biologische Schutzstufe / Zitation
Zitat | HEK293T/17 (Cytion Katalognummer 305117) |
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Biosicherheitsstufe | 1 |
Expression / Mutation
Antigenexpression | SV40 T-Antigen |
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Viren | SV40 (exprimiert das SV40 T-Antigen) |
Handhabung
Nährboden | DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 1,5 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a) |
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Mittlere Supplemente | Supplemente des Mediums mit 10% FBS |
Passage-Lösung | Accutase |
Subkultivierung | Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten. |
Splitverhältnis | 1:2 bis 1:4 |
Medienwechsel | 2 bis 3 Mal pro Woche |
Einfriermedium | CM-1 (Cytion Katalognummer 800100) oder CM-ACF (Cytion Katalognummer 806100) |
Handhabung von kryokonservierten Kulturen |
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Qualitätskontrolle / Genetisches Profil / HLA
Sterilität | Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen. Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft. |
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STR profile |
Amelogenin: x,x
CSF1PO: 11,12
D13S317: 12,14
D16S539: 9,13
D5S818: 8,9
D7S820: 11
TH01: 7,9.3
TPOX: 11
vWA: 16,19
D3S1358: 15,16,17
D21S11: 28,30.2
D18S51: 17,18
Penta E: 7,15
Penta D: 9,10
D8S1179: 11,12,14
FGA: 23
D6S1043: 11
D2S1338: 19
D12S391: 19,21
D19S433: 18
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