4T1-Zellen
Produktnummer:
300300
Wesentliche Fakten über die 4T1-Brustkrebs-Zelllinie
Beschreibung | Die 4T1-Zelllinie des murinen Mammakarzinoms ist ein in der Krebsforschung weit verbreitetes Modell, da es dem menschlichen Brustkrebs sehr ähnlich ist. Die 4T1-Zelllinie, die von einer BALB/c-Maus abstammt, ähnelt in ihrem Tumorwachstum und ihrer metastatischen Ausbreitung stark dem Verhalten von Brustkrebs im Spätstadium beim Menschen. Die 4T1-Zelllinie ist ein unschätzbares Instrument zur Untersuchung der Progression und Metastasierung von Brustkrebs, einschließlich Knochenmetastasen und Brustkrebsmetastasen. Wenn 4T1-Zellen in BALB/c-Mäuse injiziert werden, bilden sie spontan hochgradig metastatische Tumore, die sich auf verschiedene Organe wie Lunge, Leber, Lymphknoten und Knochen ausbreiten können, während der Primärtumor in situ weiter wächst. Dieses syngene 4T1-Modell eignet sich besonders für die Untersuchung von Knochenmetastasen und des metastatischen Phänotyps. Der Nutzen der 4T1-Zellen erstreckt sich auf Techniken wie Biolumineszenz-Imaging, histologische Analysen und die Verwendung molekularer Marker, um die Ausbreitung und die Auswirkungen der metastatischen Erkrankung zu verfolgen. Dieser Ansatz ermöglicht die Untersuchung der spontanen Metastasierung von Primärtumoren in entfernte Organe, unterstützt durch Techniken wie die Durchflusszytometrie zur Analyse von Tumorzellen und ihrer Rezeptorexpression. Das bildgebende 4T1-Modell hat die biophotonische Bildgebung zur Verfolgung des Tumorwachstums und der Metastasierung in vivo in Tiermodellen ermöglicht und Studien über metastatische Zellen in Zielorganen und Tumorherden erleichtert. Die immunkompetente Natur der 4T1-Brusttumorzelllinie der Maus ermöglicht Untersuchungen zur Rolle des Immunsystems und der Immunität bei der Metastasierung sowie zur Immuntherapie von Krebs. Darüber hinaus hat sich das syngene 4T1-Tumormodell als hilfreich für die omics-Charakterisierung und den Nachweis von Fusionsgenen erwiesen. Insgesamt dient die 4T1-Mammakarzinom-Zelllinie als vielseitiges Instrument zur Untersuchung der Biologie von Mammatumoren, der Tumormetastasierung und der Entwicklung neuer Behandlungsmethoden sowohl bei Mäusen als auch bei Menschen. |
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Organismus | Maus |
Gewebe | Brust, Brustdrüse |
Krankheit | Bösartiges Neoplasma |
Anwendungen | 4T1-Zellen ahmen die Eigenschaften von menschlichem Brustkrebs in seinem fortgeschrittensten Stadium - Stadium IV - genau nach. |
Synonyme | 4T1-A, 4T1.0, 4T1/WT |
Einzelheiten
Geschlecht | Weiblich |
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Morphologie | Epithelial |
Wachstumseigenschaften | Adhärent |
Spezifikationen der 4T1-Tumorzelllinie
Zitat | 4T1 (Cytion Katalognummer 300300) |
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Biosicherheitsstufe | 1 |
Genetische Merkmale
Tumorigene | Ja, bei BALB/c-Mäusen. |
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Wartungstechniken
Nährboden | RPMI 1640, w: 2,1 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a) |
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Mittlere Supplemente | Supplemente des Mediums mit 10% FBS |
Passage-Lösung | Accutase |
Subkultivierung | Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten. |
Einfriermedium | CM-1 (Cytion Katalognummer 800100) oder CM-ACF (Cytion Katalognummer 806100) |
Handhabung von kryokonservierten Kulturen | 4T1-Zellen werden in tiefgefrorenem Zustand auf Trockeneis versandt. Vergewissern Sie sich bei Erhalt, dass das Fläschchen gefroren ist. Lagern Sie das Kryovial sofort bei Temperaturen unter -150 Grad. Wenn Sie die Zellen sofort kultivieren wollen, tauen Sie das Fläschchen schnell auf, indem Sie es 40-60 Sekunden lang in einem 37 Grad warmen Wasserbad mit sauberem Wasser und einem antimikrobiellen Mittel schütteln. Entfernen Sie das Fläschchen, sobald sich ein kleiner Eisklumpen gebildet hat, und stellen Sie sicher, dass es kalt bleibt. Führen Sie alle weiteren Schritte unter aseptischen Bedingungen durch. Desinfizieren Sie das Kryovial unter einer sterilen Abzugshaube mit 70%igem Ethanol. Anschließend das Fläschchen vorsichtig öffnen und die Zellsuspension in ein 15-ml-Zentrifugenröhrchen überführen, das mit 8 ml Kulturmedium bei Raumtemperatur gefüllt ist. Die Zellen vorsichtig mischen. Zur Zellseparation 3 Minuten lang bei 300 x g zentrifugieren und den Überstand entsorgen. Das Auslassen der Zentrifugation ist fakultativ, allerdings sollten etwaige Reste des Gefriermediums nach 24 Stunden entfernt werden. Das Pellet vorsichtig in 10 ml frischem Kulturmedium resuspendieren und auf zwei T25-Kulturflaschen aufteilen. Für die weiteren Schritte das Subkulturprotokoll befolgen. |
Überprüfung der Qualität
Sterilität | Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl mit PCR-basierten Assays als auch mit lumineszenzbasierten Mykoplasmen-Nachweisverfahren rigoros ausgeschlossen. Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft. |
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