CHL-Zellen
Allgemeine Informationen
Beschreibung | Diese Zelllinie produziert etwa 0,1 mU t-PA pro Zelle und Tag. |
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Organismus | Hamster |
Gewebe | Lunge |
Synonyme | Chinese Hamster Lung |
Merkmale
Morphologie | Epithelial |
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Wachstumseigenschaften | Adhärent |
Identifikatoren / Biologische Schutzstufe / Zitation
Zitat | CHL (Cytion-Katalognummer 305013) |
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Biosicherheitsstufe | 1 |
Expression / Mutation
Proteinexpression | Humaner Gewebeplasminogenaktivator (T-Pa) |
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Handhabung
Nährboden | MEM (Wir liefern dieses Produkt nicht; bitte beachten Sie andere Anbieter. Bitte lassen Sie uns wissen, wenn Sie weitere Unterstützung benötigen) |
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Mittlere Supplemente | Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS, 2,0 mM L-Glutamin und Earle's BSS, das so eingestellt ist, dass es 1,5 g/L NaHCO3, 0,1 mM nicht-essentielle Aminosäuren und 1,0 mM Natriumpyruvat enthält |
Passage-Lösung | Accutase |
Subkultivierung | Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten. |
Splitverhältnis | 1:2 bis 1:4 |
Medienwechsel | 2 bis 3 Mal pro Woche |
Einfriermedium | CM-1 (Cytion Katalognummer 800100) oder CM-ACF (Cytion Katalognummer 806100) |
Handhabung von kryokonservierten Kulturen |
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Qualitätskontrolle / Genetisches Profil / HLA
Sterilität | Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen. Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft. |
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