GC-1 spg-Zellen
Allgemeine Informationen
Beschreibung | Die immortalisierte Zelllinie GC-1 spg stammt aus den Hoden einer transgenen Maus, die mit der frühen SV40-Region ausgestattet wurde. Verschiedene Zelltypen, die zum Hodenkanälchen der Maus beitragen, wurden immortalisiert und kultiviert, was zu einer vielfältigen Sammlung von Zelllinien führte. Dazu gehören 16 peritubuläre Zellen, 22 Leydig-Zellen, 8 Sertoli-Zellen und eine Keimzelllinie, GC-1 spg, die alle während der gesamten Kulturzeit ein außergewöhnliches Wachstum und eine hohe Beständigkeit aufweisen. Die GC-1 spg-Zellen, die durch Immortalisierung mit Hilfe des SV40 large T-Antigens entwickelt wurden, haben eine außergewöhnliche Stabilität und Lebensfähigkeit gezeigt. Die Etablierung der GC-1 spg-Keimzelllinie stellt eine bedeutende Leistung dar. Diese Zellen befinden sich in einem entscheidenden Entwicklungsstadium und überbrücken die Lücke zwischen Spermatogonien vom Typ B und primären Spermatozyten. Ihre ausgeprägten morphologischen und molekularen Merkmale, die durch Phasenkontrast- und Elektronenmikroskopie beobachtet werden, ermöglichen eine genaue Identifizierung. Darüber hinaus exprimieren GC-1 spg-Zellen das testikuläre Cytochrom ct und das Laktatdehydrogenase-C4-Isoenzym, was ihre Ähnlichkeit mit ihren Pendants in vivo bestätigt. Angesichts ihres Gewebsursprungs und ihrer auffallenden Ähnlichkeit mit Spermatozyten bergen GC-1 spg-Zellen ein immenses Potenzial für verschiedene Anwendungen, wobei Untersuchungen in der Reproduktionsbiologie einen besonderen Schwerpunkt bilden. Forscher können diese Zellen nutzen, um die komplizierten Vorgänge bei der Entwicklung der männlichen Keimzellen zu untersuchen und so wertvolle Einblicke in die Fortpflanzungsbiologie und Fruchtbarkeit zu gewinnen. |
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Organismus | Maus |
Gewebe | Hoden |
Anwendungen | 3D-Zellkultur |
Synonyme | GC-1spg, GC-1, GC1-SPG |
Merkmale
Alter | 10 Tage |
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Geschlecht | Männlich |
Morphologie | Epithelial |
Zelltyp | Spermatozyten |
Wachstumseigenschaften | Adhärent |
Identifikatoren / Biologische Schutzstufe / Zitation
Zitat | GC-1 spg (Cytion Katalognummer 300375) |
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Biosicherheitsstufe | 2 |
Expression / Mutation
Viren | Transformant: Simian-Virus 40 (SV40) T-Antigen |
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Handhabung
Nährboden | DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 1,5 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a) |
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Mittlere Supplemente | Supplemente des Mediums mit 10% FBS |
Passage-Lösung | Accutase |
Subkultivierung | Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten. |
Einfriermedium | CM-1 (Cytion Katalognummer 800100) oder CM-ACF (Cytion Katalognummer 806100) |
Handhabung von kryokonservierten Kulturen |
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Qualitätskontrolle / Genetisches Profil / HLA
Sterilität | Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen. Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft. |
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