HEP3B-Zellen
Allgemeine Informationen über die Hep-3B-Zelllinie
Beschreibung | Die Hep3B-Zelllinie, die von einem 8-jährigen Kind mit Leberkrebs stammt, ist ein zentrales Modell für die Untersuchung menschlicher Leberkrebszellen und ihrer Reaktion auf verschiedene therapeutische Wirkstoffe. Hep3B-Zellen enthalten ein integriertes Hepatitis-B-Virusgenom und sind aufgrund ihrer einzigartigen genetischen und phänotypischen Eigenschaften ein wichtiger Bestandteil bei der Untersuchung unterschiedlicher Arzneimittelreaktionen. Die menschliche Hepatomzelllinie Hep 3B ist bekannt für ihre umfangreiche Expression von leberspezifischen Proteinen wie Alpha-Fetoprotein (AFP), Albumin und verschiedenen anderen Markern, was sie zu einem unschätzbaren Werkzeug bei Studien zum Arzneimittelstoffwechsel und zur Hepatotoxizität macht. Diese breite Palette an exprimierten Proteinen ermöglicht eine umfassende Bewertung der Interaktion von Leberkrebszellen mit therapeutischen Wirkstoffen und deren Metabolisierung. Die Hep 3B-Zelllinie und ihre Derivate, wie z. B. luciferaseexprimierende Varianten, ermöglichen die Verfolgung des Tumorwachstums und der Metastasierung in vivo, was die Untersuchung des Fortschreitens von Leberkrebs und der Wirksamkeit potenzieller Behandlungen erleichtert. Die Hep3B-Zelllinie ist eine wichtige Ressource, um unser Verständnis der Biologie von Leberkrebs zu verbessern und wirksamere therapeutische Strategien zu entwickeln. |
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Organismus | Menschen |
Gewebe | Leber |
Krankheit | Hepatozelluläres Karzinom im Kindesalter |
Synonyme | Hep 3B2_1-7, HEP3B217, Hep 3B2, HEP-3B2, HEP3B2, Hep-3B, HEP-3B, Hep 3B, Hep3B, HEP3B |
Eigenschaften
Alter | 8 Jahre |
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Geschlecht | Männlich |
Ethnizität | Afrika |
Morphologie | Epithelial |
Wachstumseigenschaften | Adhärent |
Angaben zur Leberkrebs-Zelllinie Hep3B
Zitat | Hep 3B2.1-7 (Cytion Katalognummer 305141) |
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Biosicherheitsstufe | 1 |
Genetisches Profil
Proteinexpression | Alpha-Fetoprotein (Alpha-Fetoprotein), Hepatitis-B-Oberflächenantigen (Hbsag), Albumin, Alpha2-Makroglobulin (Alpha-2-Makroglobulin), Alpha1-Antitrypsin (Alpha-1-Antitrypsin), Transferrin,, Alpha1-Antichymotrypsin (Alpha-1-Antichymotrypsin), Haptoglobin, Cerulopl |
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Tumorigene | Ja |
Kultivierungsmethoden
Nährboden | EMEM, w: 2 mM L-Glutamin, w: 1,5 g/L NaHCO3, w: EBSS, w: 1 mM Natriumpyruvat, w: NEAA (Cytion-Artikelnummer 820100c) |
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Mittlere Supplemente | Supplemente des Mediums mit 10% FBS |
Passage-Lösung | Accutase |
Subkultivierung | Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten. |
Splitverhältnis | 1:2 bis 1:4 |
Medienwechsel | 2 bis 3 Mal pro Woche |
Einfriermedium | CM-1 (Cytion Katalognummer 800100) oder CM-ACF (Cytion Katalognummer 806100) |
Handhabung von kryokonservierten Kulturen | Hep 3B2.1-7-Zellen werden in tiefgefrorenem Zustand auf Trockeneis versandt. Vergewissern Sie sich bei Erhalt, dass das Fläschchen gefroren ist. Lagern Sie das Kryovial sofort bei Temperaturen unter -150 Grad. Wenn Sie die Zellen sofort kultivieren wollen, tauen Sie das Fläschchen schnell auf, indem Sie es 40-60 Sekunden lang in einem 37 Grad warmen Wasserbad mit sauberem Wasser und einem antimikrobiellen Mittel schütteln. Entfernen Sie das Fläschchen, sobald sich ein kleiner Eisklumpen gebildet hat, und stellen Sie sicher, dass es kalt bleibt. Führen Sie alle weiteren Schritte unter aseptischen Bedingungen durch. Desinfizieren Sie das Kryovial unter einer sterilen Abzugshaube mit 70%igem Ethanol. Anschließend das Fläschchen vorsichtig öffnen und die Zellsuspension in ein 15-ml-Zentrifugenröhrchen überführen, das mit 8 ml Kulturmedium bei Raumtemperatur gefüllt ist. Die Zellen vorsichtig mischen. Zur Zellseparation 3 Minuten lang bei 300 x g zentrifugieren und den Überstand entsorgen. Das Auslassen der Zentrifugation ist fakultativ, allerdings sollten etwaige Reste des Gefriermediums nach 24 Stunden entfernt werden. Das Pellet vorsichtig in 10 ml frischem Kulturmedium resuspendieren und auf zwei T25-Kulturflaschen aufteilen. Für die weiteren Schritte das Subkulturprotokoll befolgen. |
Sicherung der Qualität
Sterilität | Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl mit PCR-basierten Assays als auch mit lumineszenzbasierten Mykoplasmen-Nachweisverfahren rigoros ausgeschlossen. Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft. |
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STR profile |
Amelogenin: x,x
CSF1PO: 8
D13S317: 12,14
D16S539: 10
D5S818: 13
D7S820: 8,10
TH01: 6,7
TPOX: 9
vWA: 17
D3S1358: 15
D21S11: 30,31
D18S51: 20
Penta E: 5,16
Penta D: 12,14
D8S1179: 12
FGA: 18
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