HuH-6-Zellen
Produktnummer:
305092
Allgemeine Informationen
Beschreibung | HuH-6-Zellen, kurz für Human Hepatoma 6 cells, sind eine permanente Zelllinie, die aus dem Hepatomgewebe eines 57-jährigen Japaners aus dem Jahr 1982 gewonnen wurde. Diese Zellen sind zu einem wertvollen Werkzeug in der biologischen Forschung geworden, da sie einen bequemen Ersatz für primäre Hepatozyten darstellen. Die Hauptanwendung von HuH-6-Zellen liegt in der Untersuchung von Hepatitis-C-Virus (HCV)-Infektionen und Hepatomen. Forscher verwenden diese Zellen häufig als Zellkulturmodell, um die Mechanismen der HCV-Infektion zu untersuchen und potenzielle Behandlungsmöglichkeiten für Hepatome zu erforschen. Ein wichtiges Forschungsgebiet, an dem HuH-6-Zellen beteiligt sind, ist das Verständnis des Arzneimittelstoffwechsels und der Pharmakokinetik. Diese Zellen werden häufig verwendet, um das Potenzial für Wechselwirkungen zwischen Arzneimitteln durch die Analyse der Genexpression verschiedener CYP450-Enzyme zu bewerten. Die Zulassungsbehörden verlangen eine Bewertung des DDI-Potenzials in Hepatozyten für bestimmte Enzyme wie CYP3A4, CYP1A2 und CYP2B6. HuH-6-Zellen, bekannt als kryokonservierte menschliche Hepatozyten, Induktion qualifiziert (HUCPI), wurden so charakterisiert, dass sie die von der FDA für die Bewertung von DDIs empfohlenen Enzyminduktionswerte aufweisen. Eine weitere wichtige Anwendung von HuH-6-Zellen ist die Untersuchung der Transporter-vermittelten Effluxhemmung. Wenn die Hepatozyten auf Kollagen plattiert und mit einem Basalmembran-Extrakt überzogen werden, lassen sich polarisierte Zelloberflächenstrukturen bilden und die Reexpression von Gallenefflux-Transportern erreichen. Dies ermöglicht es den Forschern, die Auswirkungen der Hemmung von Arzneimitteln auf den Gallenefflux-Transport zu untersuchen, die von Wechselwirkungen zwischen Arzneimitteln bis hin zur Lebertoxizität durch die Anhäufung von intrazellulären Gallensäuren reichen können. Hepatozyten, die für die Transporterfunktion vorcharakterisiert sind, eignen sich gut für diese Studien. Darüber hinaus spielen HuH-6-Zellen eine entscheidende Rolle bei der pharmazeutischen Entdeckung von Arzneimitteln mit einem langsameren Stoffwechsel. Durch die Messung der grundlegenden Stoffwechseleigenschaften von Medikamenten, die langsamer verstoffwechselt werden, können Forscher Medikamente entwickeln, die über einen längeren Zeitraum wirksam bleiben. Plattierte Hepatozyten, wie HuH-6-Zellen, behalten ihre Stoffwechselaktivität über einen längeren Zeitraum bei und sind daher ideal für Tests, die vier Stunden oder länger dauern. Hepatozyten, die für eine geringe Clearance präqualifiziert sind, sind für diese Studien besonders wertvoll, obwohl auch Induktions- oder Transporter-qualifizierte Hepatozyten (HUCPI) verwendet werden können. HuH-6-Zellen sind eine wertvolle Zelllinie, die aus Hepatomgewebe gewonnen wird. Sie werden in der biologischen Forschung häufig zur Untersuchung der Hepatitis-C-Virusinfektion, des Hepatoms, des Arzneimittelstoffwechsels und der Pharmakokinetik, der Wechselwirkungen zwischen Arzneimitteln, der Transporter-vermittelten Effluxhemmung und der Entdeckung von Arzneimitteln mit einem langsameren Stoffwechsel verwendet. Diese Zellen bieten Forschern ein praktisches und zuverlässiges Modell für die Untersuchung verschiedener Aspekte der Leberbiologie und der Arzneimittelentwicklung. |
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Organismus | Menschen |
Gewebe | Leber |
Krankheit | Hepatoblastom |
Synonyme | HUH-6, HuH 6, HuH6, HUH6, Huh6 |
Merkmale
Alter | 1 Jahr |
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Geschlecht | Männlich |
Ethnizität | Asiatisch |
Morphologie | Epithelial |
Wachstumseigenschaften | Adhärent |
Identifikatoren / Biologische Schutzstufe / Zitation
Zitat | HuH-6 (Cytion-Katalognummer 305092) |
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Biosicherheitsstufe | 1 |
Expression / Mutation
Handhabung
Nährboden | DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 1,5 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a) |
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Mittlere Supplemente | Supplemente des Mediums mit 10% FBS |
Passage-Lösung | Accutase |
Subkultivierung | Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten. |
Splitverhältnis | 1:2 bis 1:4 |
Medienwechsel | 2 bis 3 Mal pro Woche |
Einfriermedium | CM-1 (Cytion Katalognummer 800100) oder CM-ACF (Cytion Katalognummer 806100) |
Handhabung von kryokonservierten Kulturen | HuH-6-Zellen werden in tiefgefrorenem Zustand auf Trockeneis versandt. Vergewissern Sie sich bei Erhalt, dass das Fläschchen gefroren ist. Lagern Sie das Kryovial sofort bei Temperaturen unter -150 Grad. Wenn Sie die Zellen sofort kultivieren wollen, tauen Sie das Fläschchen schnell auf, indem Sie es 40-60 Sekunden lang in einem 37 Grad warmen Wasserbad mit sauberem Wasser und einem antimikrobiellen Mittel schütteln. Entfernen Sie das Fläschchen, sobald sich ein kleiner Eisklumpen gebildet hat, und stellen Sie sicher, dass es kalt bleibt. Führen Sie alle weiteren Schritte unter aseptischen Bedingungen durch. Desinfizieren Sie das Kryovial unter einer sterilen Abzugshaube mit 70%igem Ethanol. Anschließend das Fläschchen vorsichtig öffnen und die Zellsuspension in ein 15-ml-Zentrifugenröhrchen überführen, das mit 8 ml Kulturmedium bei Raumtemperatur gefüllt ist. Die Zellen vorsichtig mischen. Zur Zellseparation 3 Minuten lang bei 300 x g zentrifugieren und den Überstand entsorgen. Das Auslassen der Zentrifugation ist fakultativ, allerdings sollten etwaige Reste des Gefriermediums nach 24 Stunden entfernt werden. Das Pellet vorsichtig in 10 ml frischem Kulturmedium resuspendieren und auf zwei T25-Kulturflaschen aufteilen. Für die weiteren Schritte das Subkulturprotokoll befolgen. |
Qualitätskontrolle / Genetisches Profil / HLA
Sterilität | Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl mit PCR-basierten Assays als auch mit lumineszenzbasierten Mykoplasmen-Nachweisverfahren rigoros ausgeschlossen. Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft. |
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STR profile |
Amelogenin: x,y
CSF1PO: 10,12
D13S317: 8,12
D16S539: 10,11
D5S818: 8,11
D7S820: 11,12
TH01: 7,8
TPOX: 8
vWA: 14,17
D3S1358: 14,17
D21S11: 29,30
D18S51: 13,21
Penta E: 11
Penta D: 9,13
D8S1179: 10,11
FGA: 19,24
D6S1043: 13,18
D2S1338: 18
D12S391: 18,20
D19S433: 12,12.2
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