Jurkat-Zellen
Wichtige Fakten über Jurkat-Zellen
Beschreibung | Jurkat-Zellen, die aus dem peripheren Blut eines 14-Jährigen mit akuter lymphoblastischer T-Zell-Leukämie (T-ALL) stammen, sind eine bekannte menschliche T-Lymphozyten-Zelllinie, die häufig in zellbiologischen Studien verwendet wird, insbesondere in der Krebsforschung und bei der Untersuchung von Störungen des Immunsystems. Diese Zellen spielen eine entscheidende Rolle für das Verständnis verschiedener zellulärer Prozesse, einschließlich der Zelltodmechanismen, der Autophagie-Aktivität und der zytoplasmatischen Transkriptionsfaktoren. Jurkat-Zellen werden in der HIV-Forschung häufig verwendet, da sie den CD4-Rezeptor auf ihrer Zellmembran exprimieren. Der CD4-Rezeptor ist ein Hauptrezeptor, den HIV benutzt, um in Wirtszellen einzudringen. Da Jurkat-Zellen diesen Rezeptor exprimieren, können sie von HIV infiziert werden, was sie zu einem nützlichen Modell für die Untersuchung der Interaktionen von HIV mit menschlichen T-Zellen macht, die ein Hauptziel des Virus im menschlichen Körper sind. Die Verwendung von Jurkat-Zellen bei Studien zur HIV-Aktivierung und zum Lebenszyklus der HIV-Infektion hat wesentlich zum Verständnis der Interaktionen des Virus mit menschlichen Zellen beigetragen und war für die Identifizierung potenzieller Ziele für antiretrovirale Therapien von großer Bedeutung. Jurkat-Zellen spielen darüber hinaus eine zentrale Rolle in der biomedizinischen Forschung, insbesondere bei der Bewertung von Zytotoxizitäts- und Zelllebensfähigkeitstests. Dies macht sie unentbehrlich, um die Wirksamkeit potenzieller Krebstherapien und Wirkstoffe, die die Immunantwort modulieren, zu testen. Mit Hilfe von Jurkat-Zellen können Wissenschaftler die Auswirkungen zytotoxischer Substanzen auf die Integrität und Funktion der Zellmembran, einschließlich der Aspekte, die mit der Permeabilität der Zellmembran und ihren Transporteigenschaften zusammenhängen, genau analysieren. Darüber hinaus bietet das Vorhandensein von Mutationen im Lck-Gen in Jurkat-Zellen, das zu einer anhaltenden Aktivierung von T-Zellen führt, ein einzigartiges Modell für eingehende Untersuchungen der T-Zell-Aktivierung und der Signalwege. Dies ist wichtig für das Verständnis der komplexen Prozesse der Lymphozytenaktivierung, die den Zellzyklus, das Zellwachstum und die Differenzierung umfassen. Diese Erkenntnisse sind entscheidend für die Entwicklung von Strategien zur Modulation von Immunantworten bei verschiedenen Krankheiten. Die Entwicklung eines spezifischen Jurkat-Zellderivats, bekannt als Jurkat E6.1, hat unser Verständnis der zellulären Mechanismen erheblich verbessert. Dieses Derivat bietet ein verfeinertes Instrument, um das nuancierte Verhalten von Zellmembranen und die physiologischen Reaktionen einzelner Zellen unter experimentellen Bedingungen zu untersuchen. Durch die Verwendung von Jurkat E6.1-Zellen konnten die Forscher grundlegende zelluläre Prozesse und ihre Auswirkungen auf Gesundheit und Krankheit aufklären. Zusammenfassend lässt sich sagen, dass Jurkat-Zellen in einer Vielzahl von Forschungsbereichen - von der Krebsbiologie bis hin zu Studien über HIV-Infektionen - als unschätzbare Werkzeuge dienen, die Einblicke in die Zellbiologie, die Funktion des Immunsystems und potenzielle therapeutische Interventionen ermöglichen. |
---|---|
Organismus | Menschen |
Gewebe | Blut |
Krankheit | Akute lymphoblastische T-Zellen-Leukämie |
Metastasierender Ort | Peripheres Blut |
Anwendungen | Forschung im Bereich der T-Zell-Biologie, Entwicklung von T-Zell-Therapien, Untersuchung der T-Zell-Aktivierung und -Signalübertragung, Prüfung der Wirksamkeit von Arzneimitteln (z. B. Kinase-Inhibitoren), Krebsforschung mit Schwerpunkt auf akuter lymphoblastischer Leukämie der T-Zellen. |
Synonyme | JURKAT, JM, JM-Jurkat, Jurkat-FHCRC, Jurkat FHCRC, FHCRC-11, FHCRC-Subklon 11, FCCH1024 |
Merkmale der Jurkat-Zelllinie
Alter | 14 Jahre |
---|---|
Geschlecht | Männlich |
Ethnizität | Europäisch |
Morphologie | Lymphoblasten |
Wachstumseigenschaften | Aufhängung |
Dokumentation
Zitat | Jurkat (Cytion Katalognummer 302147) |
---|---|
Biosicherheitsstufe | 1 |
Genetik
Antigenexpression | Jurkat-Zellen exprimieren T-Zell-Rezeptor (TCR) und CD3-Proteine. Sie exprimieren auch CD4- und CD8-Korezeptoren, wodurch sie als Helfer- oder zytotoxische T-Zellen identifiziert werden können. |
---|---|
Mutationsprofil | Die Jurkat-Zelllinie weist genetische Mutationen auf, die sich hauptsächlich auf drei zentrale Signalwege auswirken: TCR-Signalübertragung, Genomstabilität und O-gebundene Glykosylierung. Bei der TCR-Signalübertragung stören Mutationen in PTEN, INPP5D, CTLA4 und SYK die normalen zellulären Reaktionen auf die Aktivierung des T-Zell-Rezeptors, was sich auf die Proliferation und das Überleben auswirken kann. Die Genomstabilität wird durch Mutationen in TP53, BAX und MSH2 beeinträchtigt, was zu gestörten DNA-Reparaturmechanismen und einer erhöhten Anfälligkeit für die Tumorentstehung führt. Darüber hinaus stört eine Mutation in C1GALT1C1 die O-verknüpften Glykosylierungsprozesse, was zur Expression von verkürzten O-Glykanen führt [1]. Darüber hinaus weisen die Jurkat-Zellen eine Punktmutation im Lck-Gen auf, das für ein Protein kodiert, das für die T-Zell-Aktivierung erforderlich ist, wodurch die T-Zellen konstitutiv aktiviert werden. Quellenangaben: 1. Gioia, L., Siddique, A., Head, S. R., Salomon, D. R., & Su, A. I. (2018). A genome-wide survey of mutations in the Jurkat cell line. BMC Genomics, 19, 1-13. |
Karyotyp | Die Jurkat-Zelllinie ist hypotetraploid mit einem flachen modalen Karyotyp von 46 Chromosomen und 7,8% Polyploidie. |
Handhabung
Nährboden | RPMI 1640, w: 2,1 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a) |
---|---|
Mittlere Supplemente | Supplemente des Mediums mit 10% hitzeinaktiviertem FBS |
Verdopplungszeit | 26 Stunden |
Subkultivierung | Die Zellsuspension im Kolben durch Auf- und Abpipettieren vorsichtig homogenisieren, dann eine repräsentative Probe zur Bestimmung der Zelldichte pro ml entnehmen. Die Suspension mit frischem Kulturmedium auf eine Zellkonzentration von 1 x 10^5 Zellen/ml verdünnen und die eingestellte Suspension zur weiteren Kultivierung in neue Kolben aliquotieren. |
Splitverhältnis | 1:2 bis 1:5 |
Medienwechsel | 2 bis 3 Mal pro Woche |
Einfriermedium | CM-1 (Cytion Katalognummer 800100) oder CM-ACF (Cytion Katalognummer 806100) |
Handhabung von kryokonservierten Kulturen | Jurkat-Zellen werden in tiefgefrorenem Zustand auf Trockeneis versandt. Vergewissern Sie sich bei Erhalt, dass das Fläschchen gefroren ist. Lagern Sie das Kryovial sofort bei Temperaturen unter -150 Grad. Wenn Sie die Zellen sofort kultivieren wollen, tauen Sie das Fläschchen schnell auf, indem Sie es 40-60 Sekunden lang in einem 37 Grad warmen Wasserbad mit sauberem Wasser und einem antimikrobiellen Mittel schütteln. Entfernen Sie das Fläschchen, sobald sich ein kleiner Eisklumpen gebildet hat, und stellen Sie sicher, dass es kalt bleibt. Führen Sie alle weiteren Schritte unter aseptischen Bedingungen durch. Desinfizieren Sie das Kryovial unter einer sterilen Abzugshaube mit 70%igem Ethanol. Anschließend das Fläschchen vorsichtig öffnen und die Zellsuspension in ein 15-ml-Zentrifugenröhrchen überführen, das mit 8 ml Kulturmedium bei Raumtemperatur gefüllt ist. Die Zellen vorsichtig mischen. Zur Zellseparation 3 Minuten lang bei 300 x g zentrifugieren und den Überstand entsorgen. Das Auslassen der Zentrifugation ist fakultativ, allerdings sollten etwaige Reste des Gefriermediums nach 24 Stunden entfernt werden. Das Pellet vorsichtig in 10 ml frischem Kulturmedium resuspendieren und auf zwei T25-Kulturflaschen aufteilen. Für die weiteren Schritte das Subkulturprotokoll befolgen. |
Qualitätskontrolle der Lymphozyten-Zelllinie Jurkat
Sterilität | Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl mit PCR-basierten Assays als auch mit lumineszenzbasierten Mykoplasmen-Nachweisverfahren rigoros ausgeschlossen. Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft. |
---|