Super-Röhrchen-Zellen
Allgemeine Informationen
Beschreibung | Super Tube ist eine epothelialähnliche Zelllinie, die aus MDCK, einer Zelllinie eines adulten Cockerspaniels (Canis familiaris), geklont wurde. Im Vergleich zur ursprünglichen Zelllinie exprimiert Super Tube einen viel niedrigeren zyklischen AMP-Ruhewert und reagiert weniger leicht auf die Stimulation der Adenylatzyklase durch Forskolin. Außerdem weist Super Tube im Vergleich zu Super Dome und MDCK eine geringere transepitheliale Resistenz auf. |
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Organismus | Hund |
Gewebe | Normale Niere |
Synonyme | MDCK-Röhrchen, SuperTube |
Merkmale
Alter | Erwachsener |
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Geschlecht | Weiblich |
Morphologie | Epithelial |
Wachstumseigenschaften | Adhärent |
Identifikatoren / Biologische Schutzstufe / Zitation
Zitat | Super Tube (Cytion Katalognummer 305004) |
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Biosicherheitsstufe | 1 |
Expression / Mutation
Handhabung
Nährboden | DMEM:Ham's F12, w: 3,1 g/L Glucose, w: 1,6 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820400a) |
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Mittlere Supplemente | Supplementierung des Mediums mit 10% FBS, 0,05 mM nicht-essentiellen Aminosäuren |
Passage-Lösung | Accutase |
Subkultivierung | Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten. |
Splitverhältnis | 1: 3 bis 1: 4 |
Medienwechsel | 2 bis 3 Mal pro Woche |
Einfriermedium | CM-1 (Cytion Katalognummer 800100) oder CM-ACF (Cytion Katalognummer 806100) |
Handhabung von kryokonservierten Kulturen |
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Qualitätskontrolle / Genetisches Profil / HLA
Sterilität | Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen. Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft. |
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