HT-29 Zelllinie

HT-29 ist eine menschliche Kolorektalkrebs-Zelllinie, die in der Krebs- und Toxikologie-Forschung vielseitig einsetzbar ist. So reagieren diese Zellen beispielsweise empfindlich auf Standard-Chemotherapeutika gegen Darmkrebs. Darüber hinaus ist die HT-29-Zelllinie ein gut charakterisiertes In-vitro-Modell zur Untersuchung der Reaktion des Darmepithels auf bakterielle Infektionen. Die HT-29-Zellen ahmen die Eigenschaften von reifen Darmzellen, d.h. Enterozyten, nach und eignen sich daher für Anheftungs- und mechanistische Studien.

Dieser Artikel befasst sich mit allen Aspekten der HT-29-Zelllinie, die Sie kennen sollten, bevor Sie mit ihr arbeiten. Im Wesentlichen geht es um Folgendes:

HT-29-Zellen: Herkunft und allgemeine Informationen
Informationen zur Zellkultur der HT-29-Zelllinie
HT-29-Zellen: Vorteile und Beschränkungen
HT-29-Zellen: Anwendungen
Forschungspublikationen über HT-29-Zellen
HT-29-Zellen Ressourcen: Protokolle, Videos und mehr

1. HT-29-Zellen: Herkunft und allgemeine Informationen

Bevor Sie eine Zelllinie verwenden, sollten Sie sich über die allgemeinen Merkmale und die Herkunft der Zelllinie informieren. Dieser Abschnitt soll Ihnen dabei helfen: Was sind die HT-29-Zellen? Handelt es sich bei HT-29 um eine Kolorektalkrebs-Zelllinie? Wie sieht die Morphologie der HT-29-Zellen aus?

Was ist die HT-29-Zelllinie? HT-29 ist eine kolorektale Adenokarzinom-Zelllinie, die 1964 von Trempe und Fogh entwickelt wurde. Die Zellen wurden ursprünglich aus dem Primärtumor einer kaukasischen Frau (44 Jahre alt) mit kolorektalem Adenokarzinom gewonnen [1]. Seit ihrer Etablierung wird diese Zelllinie zur Untersuchung der Biologie von Krebserkrankungen verwendet.

Morphologie der HT-29-Zellen: Die HT-29-Zelllinie weist im Allgemeinen eine epithelähnliche Morphologie auf. Differenzierte Zellen wachsen in Monolayern, bilden enge Zell-Zell-Verbindungen und besitzen einen apikalen Bürstensaum. Werden diese Zellen in einem Medium mit Glukosemangel gezüchtet oder erhalten sie Induktoren wie Butyrat oder Säure, weisen sie enterozytenähnliche Merkmale auf.

Größe der Zellen: Der Durchmesser der HT-29-Kolorektalkarzinom-Zelllinie beträgt 11 μm.

Genom und Ploidie: Die modale Chromosomenzahl der HT-29-Zelllinie beträgt 71. Sie kann zwischen 68 und 72 liegen. Darüber hinaus ist die gestraffte Chromosomenzahl für HT-29-Zellen hyper-triploid, wobei die 2S-Komponente zu 2,4 % vorkommt.

Was ist HT29 MTX? HT29 MTX ist eine Methotrexat-resistente Zelllinie, die aus der ursprünglichen menschlichen Kolonkrebs-Zelllinie HT-29 durch Anpassung an 10 µM Methotrexat isoliert wurde. Diese Zellen weisen Merkmale von schleimabsondernden reifen Becherzellen auf.

Teilung und Bewegung von Dickdarmkrebszellen unter dem Mikroskop.

2. Informationen zur Zellkultur der HT-29-Zelllinie

Das Wissen um die grundlegenden Kulturanforderungen einer Zelllinie kann Ihnen die Arbeit mit ihr erleichtern. Sie sollten wissen: Wie lang ist die Verdopplungszeit der HT-29 Zelllinie? Wie hoch ist die Aussaatdichte von HT-29-Zellen? Welche Medien für HT-29-Zellen?

Verdopplungszeit	Die mittlere Verdopplungszeit für die HT-29-Zelllinie beträgt 24 Stunden.
Adhärent/Suspension	HT-29 ist eine adhärente Zelllinie.
Aussaatdichte	Die empfohlene Aussaatdichte für HT-29-Zellen beträgt 3 x¹⁰⁴ ^Zellen/cm2. Gewachsene Zellen werden mit 1 x PBS gewaschen und nach 8-10 Minuten Inkubation mit Accutase abgelöst. Frisches Medium wird zugegeben, und die Zellen werden zentrifugiert. Das Zellpellet wird resuspendiert, und die Zellen werden in neue Flaschen mit der empfohlenen Zelldichte verteilt.
Wachstumsmedium	Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM), ergänzt mit 2,5 mM L-Glutamin und 10 % FBS, wird für die optimale Kultivierung von HT-29-Zellen verwendet. Das Medium sollte 2 bis 3 Mal pro Woche ausgetauscht werden.
Wachstumsbedingungen	HT-29-Zellen benötigen für ihr Wachstum einen befeuchteten Inkubator mit einer Temperatur von 37 °C und 5 %_CO2-Zufuhr.
Lagerung	Diese Zellen werden in der Dampfphase von flüssigem Stickstoff bei unter -195°C gelagert.
Einfriermedium und Verfahren	Das für die HT-29-Zelllinie verwendete Einfriermedium ist CM-1 oder CM-ACF. Die Zellen werden durch ein langsames Einfrierverfahren eingefroren, das einen Temperaturabfall von 1 °C bewirkt und die Lebensfähigkeit der Zellen wirksam schützt.
Auftauprozess	Die eingefrorenen HT-29-Zellen werden in einem Wasserbad bei 37 °C aufgetaut. Diese Zellen können resuspendiert und direkt in den Kolben mit frischem Wachstumsmedium gegeben werden. Im Gegensatz dazu können die aufgetauten Zellen zentrifugiert werden, um Elemente des Gefriermediums zu entfernen, in frischem Medium resuspendiert und in Kolben kultiviert werden.
Biologische Schutzstufe	Für die Handhabung und Pflege der HT-29-Zelllinie gilt Biologische Schutzstufe 1.

HT-29-Zellen unter 10facher und 20facher Vergrößerung.

3. HT-29-Zellen: Vorteile und Beschränkungen

Jede Zelllinie hat einzigartige Vor- und Nachteile, die sie von anderen Zelllinien unterscheiden. In diesem Abschnitt werden die wichtigsten Vorteile und Einschränkungen im Zusammenhang mit HT-29-Zellen behandelt.

Vorteile

Die wichtigsten Vorteile von HT-29-Zellen sind:

Einfach zu kultivieren
Die HT-29-Zelllinie ist einfach zu handhaben und zu pflegen, ohne dass komplexe Anforderungen an die Kultivierung gestellt werden. Sie wird in Forschungslabors häufig kultiviert.
In-vitro-Modell von Darmzellen
HT-29-Zellen können sich unter bestimmten Kulturbedingungen in reife Darmzellen (Enterozyten und schleimproduzierende Zellen) differenzieren. Sie werden als zelluläres Modell zur Untersuchung der Nahrungsverdauung und Bioverfügbarkeit verwendet.
Hohe Transfektionseffizienz
HT-29-Kolon-Krebszellen bieten eine hohe Transfektionseffizienz und eignen sich daher für Studien zur Genexpression und -regulation. Es können sowohl transiente als auch stabile Transfektionsexperimente mit verschiedenen Methoden durchgeführt werden.
Empfindlichkeit gegenüber Medikamenten
HT-29-Zellen reagieren empfindlich auf Chemotherapeutika wie Fluorouracil und Oxaliplatin, die bei der Behandlung von Darmkrebs häufig eingesetzt werden. Sie werden zur Untersuchung der Medikamentenresistenz und zum Screening potenzieller Therapeutika für das kolorektale Karzinom eingesetzt.

Beschränkungen

Heterogenität
HT-29-Zellen weisen wie andere Krebszelllinien eine Heterogenität auf und bilden möglicherweise keine einheitliche Zellpopulation. Dies kann die Reproduzierbarkeit der Ergebnisse in bestimmten Tests beeinträchtigen und zu geringfügigen Abweichungen bei den Versuchsergebnissen führen.
Begrenzte Differenzierung
HT-29-Zellen haben ein begrenztes Differenzierungspotenzial. Sie differenzieren sich nicht vollständig in Darm- oder Kolonzellen, sondern weisen nur einige charakteristische Merkmale auf. Diese Einschränkung kann ihre Verwendung bei der Untersuchung komplexerer biologischer Prozesse einschränken.

4. hT-29-Zellen: Anwendungen

Die HT-29-Zelllinie wird aufgrund ihres breiten Anwendungsspektrums in Forschungslabors in großem Umfang gezüchtet. In diesem Abschnitt werden nur einige wichtige Anwendungen von HT-29-Zellen behandelt.

Krebsforschung: HT-29 ist eine kolorektale Adenokarzinom-Zelllinie und wird daher verwendet, um das Fortschreiten von Krebs, die Entwicklung und die zugrunde liegenden molekularen Mechanismen zu untersuchen. In einer Studie aus dem Jahr 2018 wurde die HT-29-Zelllinie verwendet, um die für die Metastasierung verantwortlichen Zellmoleküle zu untersuchen. In dieser Studie wurde festgestellt, dass die Gene Vimentin und CXCR4 die Zellmetastasierung regulieren. Die Transfektion von microRNA-193a-5p-Mimik kann die mRNA-Spiegel dieser Gene reduzieren und die Metastasierung von Krebszellen erfolgreich verringern [2].

Toxikologische Forschung: Die HT-29-Zelllinie wird in der toxikologischen Forschung häufig verwendet. Diese kolorektalen Karzinomzellen werden verwendet, um die Toxizität verschiedener Arzneimittelkandidaten mit Hilfe verschiedener Assays zu bewerten. So wurde beispielsweise in einer Studie das Toxizitätspotenzial eines ethanolischen Extrakts der Pflanze Syzygium cumini auf die HT-29-Zelllinie untersucht. Die Ergebnisse zeigten eine signifikante Unterdrückung des HT-29-Zellwachstums, was auf die vielversprechenden krebshemmenden Eigenschaften des Extrakts hinweist [3].

Mikrobiologie: HT-29 kann als Wirtszellsystem verwendet werden, um die Pathogenese potenzieller Mikroben, d.h. Bakterien und Viren, zu untersuchen. Forscher können HT-29-Zellen mit Mikroben infizieren, um deren Virulenz und Wirtsreaktion zu untersuchen. In einer solchen Studie wurden HT-29-Zellen verwendet, um die probiotischen Eigenschaften von Milchsäurebakterien zu untersuchen [4]. In einer anderen Studie wurden HT-29-Zellen verwendet, um die Wirksamkeit und Sicherheit von Bakteriophagenbehandlungen zu bewerten [5].

5. Forschungspublikationen über HT-29-Zellen

In diesem Abschnitt werden einige bemerkenswerte Veröffentlichungen über HT-29-Zellen vorgestellt, die Ihnen bei der Ausarbeitung Ihrer Forschungsstudie helfen werden.

Bewertung der Anti-Krebs-Wirkung des ethanolischen Extrakts von Syzygium cumini auf die kolorektale Zelllinie HT-29

In dieser Studie wurde der ethanolische Extrakt von Syzygium c umini als potenzieller Wirkstoff gegen die Darmkrebs-Zelllinie HT-29 vorgeschlagen. Der Extrakt unterdrückte das Wachstum der Krebszellen signifikant.

Tetrandrin hemmt das Wachstum von Kolonkarzinomzellen HT-29 über den Bcl-2/Caspase 3/PARP-Weg und die G1/S-Phase

In dieser Veröffentlichung in Bioscience Reports wurde die Anti-Krebs-Aktivität einer Verbindung, Tetradrin, an HT-29-Zellen getestet. Die Ergebnisse zeigten, dass Tetradrin die Proliferation und das Wachstum von Krebszellen über die Regulierung von Zellsignalwegen hemmt.

microRNA-193a-5p hemmt die Migration menschlicher HT-29-Kolon-Krebszellen durch Unterdrückung des Metastasierungsweges

Diese Studie legt nahe, dass miRNA-193a-5p möglicherweise die Metastasierung von HT-29-Zellen regulieren kann, indem sie metastasierungsrelevante Gene reguliert.

Bakteriophagen sind in menschlichen Zellen virulenter als in bakteriellen Kulturen; Erkenntnisse aus HT-29-Zellen

Diese Arbeit wurde 2018 in Nature Scientific Reports veröffentlicht. In dieser Studie wurde die tumorigene HT-29-Zelllinie als zelluläres Darmmodell verwendet, um die Wirksamkeit der vorgeschlagenen Bakteriophagenbehandlung zu bewerten.

Probiotische Eigenschaften von Laktobazillen und ihre Fähigkeit, die Anhaftung von enteropathogenen Bakterien an Caco-2- und HT-29-Zellen zu hemmen

In dieser Studie verwendeten die Forscher HT-29-Zellen, um die probiotischen Aktivitäten von Milchsäurebakterien zu untersuchen. Interessanterweise zeigte die Studie, dass Laktobazillen das Anhaften pathogener Bakterien an Kolonzellen verhindern.

6. HT-29-Zellen Ressourcen: Protokolle, Videos und mehr

In diesem Abschnitt finden Sie einige Online-Ressourcen zu HT-29-Zellen, die Ihnen helfen, die Protokolle für ihre Pflege, Kultivierung und Transfektion zu erlernen.

Zellkultur-Protokolle

Die folgenden Ressourcen werden Sie über die Subkultivierung von HT-29 Zellen informieren.

Kultivierung von HT-29-Zellen: Dieser Link vermittelt grundlegende Kenntnisse über das Wachstumsmedium, das Auftauen und die Subkultivierung von HT-29 Zellen.
Aufrechterhaltung von HT-29 Kulturen: Dieser Artikel enthält alle nützlichen Informationen über die Kultivierung und Pflege von HT-29-Zellen.

Transfektionsprotokolle

Die HT-29-Zelllinie weist eine hohe Transfektionseffizienz auf und wird häufig für Genexpressionsstudien verwendet. Die folgenden Ressourcen beschreiben die möglichen Transfektionsprotokolle für diese Zellen.

Transfektion von HT-29: Dieser Website-Link enthält das detaillierte Protokoll für die Transfektion von HT-29-Zellen.
Transfektion der HT-29-Zelllinie: Dieses Dokument beschreibt das Transfektionsprotokoll für die HT-29-Zelllinie mit Plasmid-DNA.

Videos zur HT-29-Zelllinie

Hier finden Sie einige Videos über die Kultivierung und Pflege dieser tumorigenen Zelllinie.

Passage von Zellen: Dieses Video zeigt das Zellpassagierungsprotokoll für adhärente Zelllinien.
Transfizieren von HT-29-Zellen: Dieses Video zeigt Ihnen die Transfektionsmethode für HT-29-Zellen.

Wir gehen davon aus, dass die Informationen in diesem Artikel wertvoll und ausreichend für Sie sind, um die Handhabung und Pflege von HT-29-Zelllinien zu handhaben. Wenn Sie planen, HT-29 Zellen in Ihrer Studie zu verwenden, bestellen Sie bei uns.

Quellenangaben

Martínez-Maqueda, D., B. Miralles, und I. Recio, HT29 Zelllinie. The Impact of Food Bioactives on Health: in vitro and ex vivo models, 2015: S. 113-124.
Shirafkan, N., et al., microRNA-193a-5p hemmt die Migration menschlicher HT-29-Kolon-Krebszellen durch Unterdrückung des Metastasierungsweges. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): p. 8775-8783.
Khodavirdipour, A., R. Zarean, and R. Safaralizadeh, Evaluation of the anti-cancer effect of Syzygium cumini ethanolic extract on HT-29 colorectal cell line. Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: p. 575-581.
Fonseca, H.C., et al., Probiotic properties of lactobacilli and their ability to inhibit the adhesion of enteropathogenic bacteria to Caco-2 and HT-29 cells. Probiotika und antimikrobielle Proteine, 2021. 13: p. 102-112.
Shan, J., et al., Bakteriophagen sind für Bakterien mit menschlichen Zellen virulenter als in bakterieller Kultur; Erkenntnisse aus HT-29-Zellen. Scientific Reports, 2018. 8(1): p. 5091.