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Raji-Zellen - Erforschung der Lymphomforschung durch den Einsatz von Raji-Zellen

Raji-Zellen sind die erste immortalisierte menschliche Zelllinie hämatopoetischen Ursprungs. Diese lymphoblastenähnlichen Zellen werden häufig in der immunologischen Forschung eingesetzt und eignen sich hervorragend für die Transfektion.

Dieser Artikel soll Ihnen helfen, die grundlegenden Konzepte der Raji-Zelllinie kennenzulernen, darunter:

  1. Allgemeine Merkmale und Ursprung der Raji-Zelllinie
  2. Informationen zur Kultivierung der Raji-Zelllinie
  3. Raji-Zelllinie: Vorteile und Nachteile
  4. Anwendungen von Raji-Zellen
  5. Forschungspublikationen mit Raji-Zellen
  6. Ressourcen für die Raji-Zelllinie: Protokolle, Videos und mehr

1. Allgemeine Merkmale und Herkunft der Raji-Zelllinie

Wenn Sie mit einer Zelllinie arbeiten wollen, suchen Sie zunächst nach ihren allgemeinen Merkmalen und ihrer Herkunft. Dieser Abschnitt des Artikels wird Ihnen dabei helfen: Was sind Raji-Zellen? Woher stammen die Raji-Zellen? Wie sieht die Morphologie von Raji-Zellen aus? Was sind die Merkmale der Raji-Zelllinie?

  • Raji, eine menschliche B-Lymphoblastoid-Zelllinie, wurde aus dem linken Oberkiefer eines nigerianischen Mannes (11 Jahre alt) gewonnen, der an einem Burkitt-Lymphom erkrankt war. Die Zelllinie wurde 1963 von R.J.V. Pulvertaft entwickelt.
  • Raji-B-Zellen wachsen in Suspensionskulturen und bilden schwimmende Cluster unterschiedlicher Größe. Diese Cluster können größer werden, wenn die Zelldichte zunimmt. In der Raji-Zellkultur finden sich jedoch auch einzelne Zellen.
  • Die lymphoblastenähnlichen Raji-Zellen haben einen relativ kleinen Zelldurchmesser von 5-8 μm. Raji-Zellen haben ein ausgedehntes Zytoplasma und einen unregelmäßig eingerückten (leicht gekrümmten) Zellkern.
  • Die Raji-Zelllinie weist einen unregelmäßigen Karyotyp auf. Es handelt sich um diploide Zellen mit einer Stammliniennummer von 46.

Bösartiges Lymphomgewebe, das unter dem Mikroskop untersucht wird.

2. kultivierung von Raji-Zellen

Die Kultivierung einer Zelllinie ist keine leichte Aufgabe, wenn man nicht mit den wichtigsten Informationen zur Kultivierung vertraut ist. Bei Raji-Zellen zum Beispiel sollten Sie das wissen: Wie lange ist die Verdopplungszeit von Raji-Zellen? Welche Medien werden für Raji-B-Zellen verwendet? Sind Raji-Zellen Suspension oder adhärent? Wie hoch ist die Aussaatdichte von Raji-Zellen? Welche Biologische Schutzstufe gilt für Raji-Zellen?

Wichtige Punkte für die Kultivierung von Raji-Zellen

Populationsverdopplungszeit:

Die Populationsverdopplungszeit für Raji-Zellen wird mit 23,2 Stunden angegeben.

Adhärent oder in Suspension:

Raji-Zellen wachsen in Suspensionskulturen und bilden schwimmende Klumpen.

Aussaat-Dichte:

Die anfängliche Zelldichte für Raji-Zellen liegt bei 1-2 x105 Zellen/ml. Für Raji-Zellen ist keine Passage-Lösung erforderlich, da sie in Suspensionskultur wachsen. Die Zellen werden in Medien verdünnt und in der erforderlichen Dichte ausgesät.

Wachstumsmedium:

Raji-Zellen werden in RPMI 1640-Medien kultiviert. Dieses Medium wird für ein ideales Zellwachstum mit L-Glutamin (2,0 mM), L-Glucose (2,0 g/L), NaHCO3 (2,0 g/L) und 10 % FBS ergänzt.

Wachstumsbedingungen:

Die Raji-Zelllinie wird in einem befeuchteten Inkubator mit 5% CO2-Zufuhr bei einer Temperatur von 37°C kultiviert.

Lagerung:

Diese Lymphoblastenzellen werden in der Dampfphase von flüssigem Stickstoff bei einer Temperatur unter -150°C gelagert, um die Lebensfähigkeit der Zellen längerfristig zu erhalten.

Einfrierverfahren und -medium:

Für Raji-Zellen werden die Einfriermedien CM-1 oder CM-ACF empfohlen. Zum Einfrieren von Zellen wird in der Regel ein langsamer Gefrierprozess verwendet, da er einen Schock der Zellen verhindert und ihre Lebensfähigkeit erhält.

Auftauprozess:

Eingefrorene Raji-Zellen werden 40 bis 60 Sekunden lang im Wasserbad (37 °C) gehalten oder bis ein kleiner Eisklumpen zurückbleibt. Die Zellen werden in Kulturmedien resuspendiert und zentrifugiert, um das Gefriermedium zu verwerfen. Anschließend werden die Zellen in frischem Medium verdünnt und zur Kultivierung in ein neues Gefäß gegeben. Der Zentrifugationsschritt kann übersprungen werden; in diesem Fall wird das Kulturmedium nach 24 Stunden ersetzt.

Biologische Schutzstufe:

Die Kultivierung von Raji-Zellen erfordert Laboreinstellungen der Biologischen Schutzstufe 1 für die Handhabung und Pflege.

Raji-Zellen, die in Suspensionen in Clustern wachsen.

3. raji: Vorteile und Nachteile

Raji ist eine bekannte Burkitt-Lymphom-Zelllinie, die in vielen Labors gezüchtet wird. Sie weist eine einzigartige Kombination von Vor- und Nachteilen auf, die sie zu einem wertvollen Forschungsinstrument machen.

Vorteile

Die Vorteile der Raji-Zelllinie sind:

Hohe Wachstumsrate

Raji-Zellen weisen eine schnelle Wachstumsrate auf und lassen sich leicht in Kulturen vermehren, wodurch sie sich für verschiedene zellbasierte Experimente eignen [2].

Immortalisierte Zelllinie

Raji ist eine kontinuierliche Zelllinie, die aus hämatologischer Herkunft stammt. Sie kann sich in Kulturen unbegrenzt vermehren und ist daher ideal für Langzeit-Zellkulturexperimente.

Anfällig für virale Infektionen

Raji-Zellkulturen sind anfällig für virale Infektionen, einschließlich des Epstein-Barr-Virus (EBV). Daher sind sie wertvoll für die Untersuchung von Virusinfektionen und die Entwicklung antiviraler Therapien.

Nachteile

Die mit Raji-B-Zellen verbundenen Nachteile sind:

Von Krebs abstammende Zelllinie

Raji-Zellen stammen von einem Patienten mit Burkitt-Lymphom und sind somit eine Krebszelllinie. Ihre Verwendung kann auf die Untersuchung der Biologie normaler B-Zellen und nicht krebsartiger Erkrankungen beschränkt sein.

Mikrobielle Kontamination

Raji-B-Zellen sind anfällig für mikrobielle Infektionen, einschließlich Bakterien und Pilze. Um eine Kontamination zu vermeiden, ist es wichtig, dass die Kultur unter aseptischen Standardbedingungen erfolgt.

4. anwendungen von Raji-Zellen

Raji-Zellen haben zahlreiche Anwendungen im Bereich der Immunologie. Einige der wichtigsten Forschungsanwendungen sind in diesem Abschnitt aufgeführt.

  • Krebsforschung: Raji ist eine aus einem Tumor stammende Zelllinie und wird daher zur Untersuchung der Krebsbiologie verwendet, einschließlich der Zell- und Molekularmechanismen, die dem Krebswachstum, der Metastasierung und der Invasion zugrunde liegen. In einer Studie wurde die Raji-Lymphom-Zelllinie verwendet, um die Mechanismen zu untersuchen, durch die das Medikament Dinaciclib den Zellzyklusstillstand und die Apoptose in Raji-Zellen auslöst. Die detaillierten Untersuchungen ergaben, dass Dinaciclib diese Wirkungen durch die Regulierung des CDK1-Signalwegs ausübt [1].
  • Entdeckung des Medikaments: Die Raji-Lymphomzellen sind ein hervorragendes Forschungsinstrument zur Bewertung von Krebsmedikamenten und -therapien. In einer im Jahr 2021 durchgeführten Studie wurden beispielsweise Burkitt-Lymphomzellen verwendet, um die krebshemmenden Eigenschaften von Zerumbone, einer natürlichen Verbindung aus Zingiber zerumbet, zu bewerten.
  • Studie über virale Infektionen: Raji-Zellen sind anfällig für Virusinfektionen und werden daher zur Untersuchung von Viren verwendet. In einer Studie wurden beispielsweise mit dem Epstein-Bar-Virus infizierte Raji-Zellen mit NK-Zellen kokultiviert und der CD21 (Epstein-Bar-Virus-Eintrittsrezeptor) unabhängige Eintritt in NK-Zellen untersucht [3].

5. forschungspublikationen mit Raji-Zellen

Hier sind einige wichtige Forschungspublikationen, die sich mit der Raji-Zelllinie befassen.

Wirkung von Meloxicam auf die Proliferation und Apoptose der Raji-Zelllinie: eine In-vitro-Studie

Diese Studie wurde im Jahr 2022 im International Journal of Dentistry veröffentlicht. Die Studie schlug vor, dass ein nichtsteroidales entzündungshemmendes Medikament, Meloxicam, krebshemmende Eigenschaften in Raji-Lymphomzellen ausübt. Es hemmt die Proliferation von Raji-Zellen und führt zum Zelltod.

Synergistische Wirkung von Ibrutinib und CD19 CAR-T-Zellen auf Raji-Zellen in vivo und in vitro

Dieser Forschungsartikel wurde im Jahr 2020 in der Zeitschrift Cancer Science veröffentlicht. In dieser Studie untersuchten die Forscher die synergistischen Effekte von CD19 CAR-T-Zellen und dem Medikament Ibrutinib auf Raji-Lymphomzellen.

Knockdown der langen nicht-kodierenden RNA PVT1 hemmt die Proliferation von Raji-Zellen durch Zellzyklusregulation

Diese in Oncology Letters (2019) veröffentlichte Studie zeigt, dass die Hemmung der lncRNA PVT1 zur Unterdrückung der Proliferation von Raji-Zellen durch die Regulierung von Zellzyklus-assoziierten Genen führt.

Hemmung des JAK2/STAT3-Signalwegs unterdrückt die Proliferation von Raji-Zellen des Burkitt-Lymphoms über Zellzyklusprogression, Apoptose und oxidativen Stress durch Modulierung von HSP70

Diese Arbeit im Medical Science Monitor (2018) verwendete Raji-Zellen und untersuchte die Rolle des JAK2/STAT3-Signalwegs bei der Regulierung verschiedener Zellprozesse, einschließlich Zellproliferation, Zelltod und oxidativem Stress.

CD21-unabhängiger Eintritt des Epstein-Barr-Virus in NK-Zellen

Diese Forschungsarbeit wurde 2018 in Cellular Immunology veröffentlicht. In dieser Studie untersuchten die Forscher den CD21-Rezeptor-unabhängigen Eintritt des Epstein-Barr-Virus in NK-Zellen. Dazu kokultivierten sie infizierte Raji-Zellen und NK-Zellen.

6. ressourcen für die Raji-Zelllinie: Protokolle, Videos und mehr

Es gibt nur wenige Ressourcen zur Raji-Zelllinie, die ihre Kultivierungs- und Transfektionsprotokolle erklären:

Zellkultur-Protokolle

Der folgende Link enthält das Zellkulturprotokoll für Raji-Zellen.

  • Kultivierung von Raji-Zellen: Diese Website enthält wichtige Informationen über Raji-Zellkulturmedien, Einfriermedien und das Protokoll für die Subkultur dieser Lymphomzellen.

Quellenangaben

  1. Zhao, H., et al., Study of the mechanism by which dinaciclib induces apoptosis and cell cycle arrest of lymphoma Raji cells through a CDK1-involved pathway. Cancer Medicine, 2019. 8(9): p. 4348-4358.
  2. Albaayit, S.F.A., K. Mariam, and R. Abdullah, Zerumbone induziert Wachstumshemmung der Burkitt-Lymphom-Zelllinie über Apoptose. Natural Volatiles and Essential Oils, 2021. 8(3): p. 56-63.
  3. Lee, J.H., et al., CD21-unabhängiger Eintritt des Epstein-Barr-Virus in NK-Zellen. Cellular Immunology, 2018. 327: p. 21-25.

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