RAW 264.7-Zelllinie in der Makrophagen- und Immunologieforschung

Beginnen wir mit RAW 264.7-Zellen, einem leistungsstarken Werkzeug für die Untersuchung von Mausmakrophagen. Die monozyten-/makrophagenähnliche Zelllinie RAW264.7 wird häufig verwendet, um zu untersuchen, wie Wirtszellen auf Mikroorganismen und deren Nebenprodukte reagieren. RAW 264.7-Zellen sind auch ein hervorragendes Instrument für die Bewertung des potenziellen therapeutischen Nutzens von Naturprodukten und ihrer Bioaktivität.

Bevor Sie jedoch mit Ihren Experimenten beginnen, sollten Sie unbedingt die Grundlagen dieser bemerkenswerten Zelllinie verstehen. Woher stammen die RAW 264.7-Zellen und wie werden sie kultiviert? Diese wichtigen Fragen stellen sicher, dass Sie das Beste aus Ihrer Forschung herausholen. Erfahren Sie also alles, was Sie über RAW 264.7-Zellen wissen müssen.

Was ist die RAW 264.7-Zelllinie?

Die RAW 264.7-Zelllinie ist eine makrophagenähnliche Zelllinie, die ursprünglich aus dem Aszites eines durch das Abelson-Leukämie-Virus (A-MuLV) induzierten Tumors in einer männlichen BALB/c-Maus gewonnen wurde. Diese Zelllinie gilt als geeignetes In-vitro-Modell für Makrophagen, da sie in der Lage ist, Phagozytose und Pinozytose durchzuführen, wesentliche Funktionen von Makrophagen im Körper [1]. RAW 264.7-Zellen sind auch eine immortalisierte Krebszelllinie, die aufgrund ihrer Fähigkeit, den Knochenumbau zu regulieren, häufig in der Forschung verwendet wird, obwohl sie keine Osteoklasten sind [2].

Die RAW 264.7-Zelllinie weist semi-adhärente Wachstumseigenschaften auf, mit spindelförmigen oder quaderförmigen adhärenten Zellen und kugelförmigen oder rundlichen schwimmenden lebensfähigen Zellen. Die Zellgröße von RAW 264.7-Zellen liegt typischerweise zwischen 10 und 20 µm im Durchmesser.

Zelluläre Funktionen und Interaktionen

RAW 264.7-Zellen spielen als Antigen-präsentierende Zellen eine zentrale Rolle im Immunsystem, indem sie Antigene verarbeiten und T-Zellen präsentieren und so Immunreaktionen auslösen. Diese Zellinteraktion ist entscheidend für das Verständnis, wie das Immunsystem Krankheitserreger erkennt und auf sie reagiert. Die Lebensfähigkeit und die zellulären Aktionen von RAW 264.7-Zellen unter verschiedenen Bedingungen liefern wichtige Erkenntnisse über Makrophagenfunktionen wie Phagozytose und Zytokinproduktion. Diese Zellen dienen auch als Modell für die Untersuchung der Zellalterung und des intrazellulären Alters, das sich auf die Immunantwort auswirken kann.

Sind RAW264.7-Zellen M1- oder M2-Makrophagen?

Makrophagen können in drei Haupttypen eingeteilt werden: M0, M1 und M2. M0-Makrophagen sind nicht aktiviert, während M1-Makrophagen pro-inflammatorisch und M2-Makrophagen anti-inflammatorisch sind [3]. RAW 264.7 M0-Zellen können sich entweder in Makrophagen vom M1- oder M2-Typ umwandeln [4].

Informationen zur Zellkultur von RAW 264.7

Bevor Sie mit Ihren Experimenten beginnen, müssen Sie einige grundlegende Informationen über diese leistungsstarke Zelllinie kennen. Kennen Sie die Verdopplungszeit von RAW 264.7-Zellen? Wie hoch ist die Aussaatdichte für diese Zellen, und sind sie adhärent? Und was sind die optimalen Wachstumsbedingungen für RAW 264.7? Lesen Sie weiter, um alle Antworten zu erhalten, die Sie für die Arbeit mit dieser unglaublichen Zelllinie benötigen!

Pionierarbeit für Ihre Forschung mit unseren RAW 264.7-Zellen

Vor- und Nachteile von RAW 264.7-Zellen

Vorteile

• Einfache Kultivierung: Die RAW 264.7-Zelllinie lässt sich ohne komplizierte Anforderungen im Labor züchten und pflegen.
• Gut charakterisiert: RAW 264.7 ist eine gut charakterisierte Zelllinie, d. h. sie weist stabile phänotypische und funktionelle Merkmale auf.
• In-vitro-Modell von Makrophagen: Da RAW 264.7-Zellen Makrophagen sind, weisen sie wesentliche makrophagenähnliche Funktionen wie Phagozytose und Pinozytose auf. Daher werden sie häufig als In-vitro-Modell für Makrophagen verwendet.
• Differenzierung zu Osteoklasten: RAW 264.7-Zellen können mit Hilfe spezifischer molekularer Faktoren in Osteoklasten differenziert werden. Diese differenzierten Zellen sind in der Lage, Knochenumbau zu betreiben, ähnlich wie Osteoklasten.

Nachteile

• Schlechte Repräsentation von primären Makrophagen: Da es sich bei RAW 264.7 um eine transformierte Zelllinie handelt, kann es sein, dass sie die Eigenschaften primärer Makrophagen nicht genau wiedergibt und einige Unterschiede in der Genexpression, dem Phänotyp und der Funktion aufweist.
• Einschränkungen beim Arzneimittel-Screening: RAW 264.7-Zellen eignen sich möglicherweise nicht für alle Arten von Arzneimittel-Screening-Tests, und ihre Reaktionen auf einige Arzneimittel können sich von denen primärer Makrophagen unterscheiden.
• Starke Zelladhäsion: RAW 264.7-Zellen haften stark an der Oberfläche der Kulturflasche und lassen sich manchmal nur schwer ablösen.

Anwendungen von RAW 264.7-Zellen

Untersuchung der zellulären Reaktionen

Aufgrund ihrer Ähnlichkeit mit Makrophagen werden RAW 264.7-Zellen häufig als In-vitro-Modell verwendet, um zelluläre Reaktionen auf Mikroben und andere biologische Produkte zu untersuchen. In einer Studie wurden RAW 264.7-Zellen beispielsweise verwendet, um die immunmodulatorische und antioxidative Aktivität von hitzeabgetöteten Milchsäurebakterien zu untersuchen [5].

In einer anderen, 2019 durchgeführten Studie wurde die immunologische Aktivität von Polysacchariden aus der Pflanze Polygonatum sibiricum an makrophagenähnlichen RAW 264.7-Zellen untersucht. Die Ergebnisse dieser Studie zeigten, dass die Polysaccharide durch die Aktivierung der NF-κB/MAPK-Zellsignalwege eine Immunantwort auslösten [6].

Osteoklastogenese-Modell

Im Zusammenhang mit der Osteoklastogenese wurden RAW 264.7-Zellen verwendet, um die Differenzierung von Makrophagen in osteoklastenähnliche Zellen zu untersuchen, wenn auch mit gewissen Einschränkungen aufgrund ihrer monozytären Abstammung. Die Untersuchung des Osteoklastenverhaltens, der Osteoklastendifferenzierung und damit verbundener Prozesse in RAW 264.7-Zellen trägt zu unserem Verständnis der Knochenresorption und der Pathogenese der Osteoporose bei. Chemische Hilfsmittel und fluoreszenzbasierte Bildgebungsverfahren, einschließlich optischer Bildgebung, werden umfassend eingesetzt, um die intrazelluläre fluoreszierende Altersbildung sichtbar zu machen und den Häm-Stoffwechsel in diesen Zellen zu untersuchen.

Molekulare Einblicke und Osteoklastogenese

Obwohl es sich in erster Linie um ein Makrophagenmodell handelt, wurden RAW 264.7-Zellen in In-vitro-Studien zur Osteoklastogenese eingesetzt, um Einblicke in die osteoklastogene Differenzierungskapazität und Genexpression zu gewinnen. Obwohl die myeloische Zelllinie kein direktes Modell für Osteoklasten ist, kann sie mit verschiedenen Faktoren behandelt werden, um osteoklastenähnliche Merkmale zu induzieren, was zum Verständnis der Osteoklastenabstammung und der Osteoklastenvorläuferzellen beiträgt. Diese Anwendung sollte jedoch mit Vorsicht angegangen werden, wenn man den Ursprung und die inhärenten Eigenschaften der Zelllinie berücksichtigt.

Screening von Naturstoffen

Die RAW 264.7-Zelllinie wird häufig zum Screening von Naturprodukten, einschließlich pflanzlicher Verbindungen, auf ihre potenzielle Bioaktivität und Wirkung verwendet. In einer von koreanischen Forschern durchgeführten Studie wurden beispielsweise RAW 264.7-Mausmakrophagen verwendet, um die immunstimulierende Wirkung einer pflanzlichen Formulierung zu untersuchen [7].

RAW 264.7-Zellen: Ressourcen, Protokolle, Videos und mehr

RAW 264.7 ist eine weit verbreitete Makrophagen-Zelllinie. Daher stehen zahlreiche Online-Ressourcen zur Verfügung, um mehr über ihre Kultur und Pflege zu erfahren.

Transfektionsprotokolle

RAW 264.7-Zellen werden häufig für Transfektionsstudien verwendet. In den folgenden Ressourcen werden verschiedene Transfektionsmethoden für die RAW 264.7-Zelllinie erläutert.

• Transfektion von RAW 264.7-Zellen: Auf dieser Website finden Sie ein Protokoll für die Transfektion von RAW 264.7-Makrophagen mit einem Lipofectamin-Reagenz.
• Transfektionsprotokoll: Dieser veröffentlichte Artikel beschreibt ein detailliertes Protokoll für die Transfektion von RAW 264.7-Zellen.
• Effiziente Transfektionsmethode für RAW 264.7-Zellen: Dieses Dokument beschreibt einen weiteren praktischen Transfektionsansatz unter Verwendung von RAW 264.7-Zellen.

Videos zum Thema RAW 264.7-Zelllinie

• Kultivierung von RAW 264.7-Zellen: Dieses Video erklärt das Protokoll zur Passage von RAW 264.7-Zellen.
• Transfektionsverfahren: In diesem Video geht es um die Transfektion von RAW 264.7-Zellen mit einem Reportergen.

Forschungspublikationen mit RAW 264.7-Zellen

Über die Mausmakrophagen-Zelllinie RAW 264.7 liegen zahlreiche Forschungspublikationen vor.

• Polysaccharide aus Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute induzieren eine Immunantwort in der RAW264.7-Zelllinie über einenNF-κB/MAPK-Weg: In dieser Studie wurde vorgeschlagen, dass Polysaccharide, die aus der Pflanze Polygonatum sibiricum gewonnen werden, eine Immunantwort in der Maus-Makrophagen-Zelllinie RAW 264.7 über die Regulierung der NF-κB/MAPK-Signalkaskade auslösen können.
• Immunmodulatorische Effekte von Tinospora crispa-Extrakt und seinen Hauptbestandteilen auf die Immunfunktionen von RAW 264.7-Makrophagen: Dieser in der Zeitschrift International Immunopharmacology veröffentlichte Artikel beschreibt, dass der Pflanzenextrakt aus Tinosporacrispa und seine Hauptbestandteile eine immunmodulatorische und immunstimulierende Wirkung auf die RAW 264.7 Makrophagen-Zelllinie haben.
• Durch Hitze abgetötete Milchsäurebakterien hemmen die Produktion von Stickstoffmonoxid über die induzierbare Stickstoffmonoxid-Synthase und die Cyclooxygenase-2 in RAW 264.7-Zellen: In dieser Studie wurde vorgeschlagen, dass hitzeabgetötete Milchsäurebakterien potenziell für die Synthese probiotischer Produkte verwendet werden können, da sie immunmodulatorische und antioxidative Eigenschaften besitzen. Die Forscher verwendeten RAW 264.7-Zellen, um diese biologischen Aktivitäten zu untersuchen.
• Wirkung der pflanzlichen Formulierung auf die Verbesserung der Immunantwort in RAW 264.7 Makrophagen: In dieser Studie wurden RAW 264.7-Zellen verwendet, um die immunstimulierende Wirkung einer pflanzlichen Formulierung namens KM1608 zu untersuchen. Die Studie deutet darauf hin, dass KM1608 ein potenzielles Mittel zur Steigerung der Immunantwort ist.
• Ein Screening von Pflanzen, die in der traditionellen kolumbianischen Medizin verwendet werden, ergab das entzündungshemmende Potenzial von Physalis angulata calyces: Diese im Saudi Journal of Biological Sciences veröffentlichte Arbeit untersuchte das entzündungshemmende Potenzial von 10 häufig verwendeten traditionellen kolumbianischen Pflanzen anhand von LPS-stimulierten RAW 264.7-Zellen.

Quellenangaben

1. Taciak, B., et al., Evaluation of phenotypic and functional stability of RAW 264.7 cell line through serial passages. PloS one, 2018. 13(6): p. e0198943.
2. Wang, S., et al., Inflammatory macrophages interrupt osteocyte maturation and mineralization via regulating the Notch signaling pathway. Molecular Medicine, 2022. 28(1): p. 102.
3. Orekhov, A.N., et al., Monozytendifferenzierung und Makrophagenpolarisierung. Vessel Plus, 2019. 3: p. 10.
4. Khabipov, A., et al., RAW 264.7 Makrophagenpolarisierung durch Bauchspeicheldrüsenkrebszellen - ein Modell zur Untersuchung von tumorfördernden Makrophagen. Anticancer Research, 2019. 39(6): p. 2871-2882.
5. Kang, C.-H., et al., Heat-killed lactic acid bacteria inhibit nitric oxide production via inducible nitric oxide synthase and cyclooxygenase-2 in RAW 264.7 cells. Probiotika und antimikrobielle Proteine, 2021. 13(6): p. 1530-1538.
6. Zhang, J., et al., Polysaccharides from Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute induce an immune response in the RAW264. 7 cell line via an NF-κB/MAPK pathway. RSC Advances, 2019. 9(31): p. 17988-17994.
7. Trinh, T.A., et al., Wirkung einer pflanzlichen Formulierung auf die Verstärkung der Immunantwort in RAW 264.7 Makrophagen. Biomolecules, 2020. 10(3): p. 424.