THP-1-Zellen enthüllt: Pionierarbeit in der Leukämieforschung
DieTHP-1-Zelllinie, bekannt als Tohoku Hospital Pediatrics-1, ist eine spontan immortalisierte Kultur menschlicher monozytärer Leukämiezellen. Sie dient als vielseitiges Modell für die Untersuchung der Biologie von Monozyten, der Makrophagenaktivitäten und ihrer Rolle bei Krebs und Immuntherapie. Die menschliche Leukämie-Zelllinie THP1 spiegelt die physiologischen und funktionellen Eigenschaften von Monozyten aus dem peripheren Blut wider, was sie zu einer unschätzbaren Ressource für die Untersuchung von Monozyten-Differenzierungsantigenen und allgemeineren Aspekten der Monozytenphysiologie macht. Dieser Artikel gibt einen grundlegenden Überblick über die THP1-Zelllinie.
Allgemeine Informationen und Ursprung der THP-1-Zelllinie
Für diejenigen, die zum ersten Mal mit der THP-1-Zelllinie arbeiten, ist es wichtig, ihre grundlegenden Eigenschaften zu verstehen. Wir werden ihre Definition, Herkunft, Morphologie, Größe und genomischen Eigenschaften erörtern.
THP-1-Zelllinie: THP-1 ist eine menschliche monozytäre Leukämie-Zelllinie, die aus dem peripheren Blut eines einjährigen Patienten stammt, bei dem 1980 eine akute monozytäre Leukämie (Subtyp M5) diagnostiziert wurde.
Morphologie: THP-1-Zellen weisen eine runde, große und singuläre Zellmorphologie auf.
Zellgröße: Diese Zellen sind relativ groß, mit einem mittleren Durchmesser von über 21 µm.
Genom und Ploidie: THP-1 ist eine nahezu diploide Zelllinie, deren Karyotyp-Analyse eine diploide Chromosomenzahl (n = 46) ergab.
Kultivierung der menschlichen Leukämiezelllinie THP-1
Angemessene Kenntnisse über die Eigenschaften einer Zelllinie vereinfachen ihre Kultivierung. In diesem Abschnitt finden Sie wichtige Informationen zur Kultivierung und Pflege der THP-1-Zelllinie, einschließlich der Verdopplungszeit, der Kulturmedien, der Adhärenz-Eigenschaften, der Aussaatdichte, der Wachstumsbedingungen, der Lagerung und der Prozesse des Einfrierens und Auftauens.
Verdopplungszeit: Die Verdopplungszeit von THP-1-Zellen beträgt etwa 35 Stunden, kann aber je nach Kulturbedingungen zwischen 19 und 50 Stunden variieren.
Adhärenz: THP-1-Zellen wachsen in Suspension, können sich aber unter bestimmten Bedingungen in adhärente makrophagenartige Zellen differenzieren.
Aussaatdichte: Die ideale Aussaatdichte liegt zwischen 1,0x10^5 und 1,5x10^6 lebensfähigen Zellen/ml. Dies wird durch Verdünnen von Zellen aus einer Lebendkultur auf die gewünschte Dichte erreicht.
Wachstumsmedium: Das empfohlene Medium ist RPMI 1640, ergänzt mit 10% FBS, 1 mM Natriumpyruvat und 2,5 mM L-Glutamin.
Wachstumsbedingungen: Die Zellen sollten in einem befeuchteten Inkubator mit einer 5%igen CO2-Zufuhr bei 37°C kultiviert werden.
Lagerung: Zur langfristigen Konservierung sollten die Zellen unter -150°C gelagert werden, um die Lebensfähigkeit zu erhalten.
Einfrierverfahren: Verwenden Sie CM-1- oder CM-ACF-Medien für ein langsames Einfrierverfahren mit einem Temperaturabfall von 1°C pro Minute.
Auftauprozess: 40-60 Sekunden lang in einem 37°C warmen Wasserbad mit einem antimikrobiellen Mittel schnell schütteln, dann in Flaschen mit Wachstumsmedien umfüllen.
Biologische Schutzstufe: THP-1-Zellen sollten in Labors der Biologischen Schutzstufe 1 gehandhabt werden.
Diese gestraffte und wissenschaftlich präzise Beschreibung liefert wesentliche Informationen über die THP-1-Zelllinie und hilft Forschern bei ihrer Arbeit mit diesem wertvollen Forschungsinstrument.
Erforschung der Makrophagenbiologie anhand der THP-1-Zelllinie: Einblicke in Differenzierung, Funktion und Immundynamik
THP-1-Zellen als Modell für die Analyse der Makrophagendifferenzierung und -funktion
Im Zusammenhang mit THP-1-Zellen kommt der Makrophagendifferenzierung und -funktion eine besondere Bedeutung zu. THP-1-Zellen sind eine menschliche Leukämie-Monozytenlinie, die häufig als Modell für die Untersuchung der Monozyten- und Makrophagenbiologie in vitro verwendet wird. Sie sind in der Lage, sich in makrophagenähnliche Zellen zu differenzieren, wenn sie mit Phorbol 12-Myristat 13-Acetat (PMA) behandelt werden, was die Umwandlung peripherer Monozyten in Makrophagen im Körper nachahmt. Nach der Differenzierung können THP-1-Makrophagen durch spezifische Stimuli entweder in M1- oder M2-Makrophagen polarisiert werden, was den M1-assoziierten pro-inflammatorischen oder den M2-assoziierten anti-inflammatorischen und gewebereparierenden Zustand widerspiegelt.
Diese differenzierten THP-1-Makrophagen behalten Schlüsselfunktionen wie Phagozytose, Antigenpräsentation und Zytokinproduktion bei, was sie zu einem unschätzbaren In-vitro-System für die Untersuchung der molekularen und zellulären Mechanismen macht, die der Reaktion von Makrophagen auf verschiedene Signale zugrunde liegen. Studien mit THP-1-Zellen haben Einblicke in die Aktivitäten von Makrophagen gegeben, darunter Reaktionen auf Infektionserreger, Interaktionen mit Krebszellen und die Rolle von Makrophagen bei der Immunregulation und Entzündung. THP-1-Zellen sind auch ein leistungsfähiges Instrument für das Screening potenzieller therapeutischer Wirkstoffe, die die Makrophagenaktivität modulieren können, und für die Erforschung der immunologischen Aspekte der Makrophagenbeteiligung an der Krankheitsentstehung und -lösung.
Erforschung der Makrophagenpolarisierung und -aktivität mit THP-1
THP-1-Zellen eignen sich hervorragend für die Untersuchung der Polarisierung menschlicher Makrophagen, einem Prozess, der für das Verständnis von Immunreaktionen bei Gesundheit und Krankheit entscheidend ist. Durch die Differenzierung von THP-1-Zellen in M0-, M1- und M2-Makrophagen können Forscher die klassische Makrophagenaktivierung (M1), die mit proinflammatorischen Reaktionen einhergeht, und die M2-Makrophagenpolarisierung, die mit entzündungshemmenden oder heilenden Prozessen verbunden ist, untersuchen. Dieses Modell der Makrophagenpolarisierung ermöglicht ein tieferes Verständnis der Anzeigefunktionen von Makrophagen in verschiedenen Zusammenhängen, einschließlich der Tumorentwicklung und der Reaktion von Krebszellen auf Therapien.
THP-1 in der Krebsforschung: Von Apoptose bis Chemoresistenz
Die THP-1-Zelllinie ist ein wichtiger Akteur bei der Untersuchung der Apoptose von Krebszellen und der Mechanismen, die der Reaktion von Tumorzellen auf Behandlungen zugrunde liegen. Assays mit THP-1-Zellen, wie ADCP-Assays, die auf spezifische Krebszellen abzielen, helfen, die Interaktionen zwischen Makrophagen und Tumorzellen, einschließlich HepG2-Zellen, aufzuklären. Darüber hinaus trägt die Untersuchung der Caspase-Aktivität in THP-1-Zellen zu unserem Verständnis der Apoptose bei, einem entscheidenden Prozess bei der Krebsentstehung und -behandlung. Die Wirkung von Chemotherapeutika wie Etoposid auf THP-1-Zellen gibt Aufschluss über die Rolle dieser Zellen bei der Chemoresistenz, was ihre Bedeutung in der Krebsforschung weiter unterstreicht.
THP-1-Zellen und Immuntherapie: Targeting und Reaktion
Im Bereich der Immuntherapie werden THP-1-Zellen als Modell für die Interaktion zwischen Immunzellen und Krebs verwendet, um zu untersuchen, wie Makrophagen zur Bekämpfung von Krebszellen, wie z. B. Raji-Zellen, eingesetzt werden können. Die Untersuchung der mRNA- und Proteinexpression in THP-1-Zellen trägt dazu bei, die komplizierten Signalwege zu verstehen, die an der Immunantwort beteiligt sind, und das Potenzial für therapeutische Eingriffe zu ermitteln. Diese Forschung ist von zentraler Bedeutung für die Entwicklung von Strategien zur Beeinflussung der Makrophagenaktivitäten im Hinblick auf verbesserte immuntherapeutische Ergebnisse.
Die THP-1-Zelllinie ist durch ihre Fähigkeit, periphere Monozyten zu imitieren und eine Makrophagenpolarisierung zu durchlaufen, zu einem Eckpfeiler bei der Erforschung der menschlichen Leukämie, der Makrophagenbiologie und ihrer Bedeutung für Krebs und Immuntherapie geworden. Seine Vielseitigkeit und Relevanz in verschiedenen Tests machen ihn zu einem unverzichtbaren Instrument, um unser Verständnis für die Rolle des Immunsystems bei Gesundheit und Krankheit zu verbessern.
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Forschungsanwendungen von THP-1-Zellen
Bevor Sie mit einer Zelllinie arbeiten, sollten Sie sich über ihre Forschungsanwendungen informieren und verstehen, wie Sie diese Zellen in Ihrer Studie einsetzen können. Wir haben hier einige wichtige Forschungsanwendungen der THP-1-Zelllinie aufgeführt.
Die THP-1-Zelllinie wird in der immunologischen Forschung häufig verwendet, da sie sich in verschiedene Immunzellen differenzieren kann. Hier sind einige Beispiele für Studien, in denen THP-1-Zellen verwendet wurden:
- In einer Studie aus dem Jahr 2018 wurden THP-1-Zellen verwendet, um Makrophagenzellen abzuleiten und Entzündungswege und damit verbundene Mechanismen zu untersuchen. Die Forscher fanden heraus, dass ein Protein namens Apolipoprotein-A-1-Bindungsprotein (AIBP) Entzündungswege stoppen kann, indem es an ApoA-1 bindet und den ATP-bindenden Kassettentransporter A1 (ABCA1) stabilisiert [3].
- In einer anderen Studie wurden THP-1-Zellen verwendet, um monozytenähnliche Zellen zu entwickeln und die Auswirkungen des Neuroprotektivums Docosahexaensäure (DHA) auf diese Zellen im Zusammenhang mit der Alzheimer-Krankheit zu untersuchen. Die Studie untersuchte mögliche Mechanismen, die der Interaktion mit dem Amyloid-beta (Aβ)-Protein zugrunde liegen [4].
- In einer anderen Studie wurden von THP-1-Zelllinien abgeleitete Makrophagen verwendet, um das tumorfördernde Potenzial von Exosomen zu untersuchen, die von Zellen des duktalen Adenokarzinoms der Bauchspeicheldrüse (PDAC) abgesondert werden [5].
Veröffentlichungen, die THP-1-Zellen in der wissenschaftlichen Forschung hervorheben
Es gibt eine Vielzahl von Studien über THP-1-Zellen. Wir haben hier einige relevante Beispiele aufgeführt:
- Apolipoprotein-A-1-Bindungsprotein hemmt Entzündungssignalwege durch Bindung an Apolipoprotein A-1 in THP-1-Makrophagen. Diese Studie wurde 2018 im Circulation Journal veröffentlicht. In dieser Forschung wurden THP-1-Zelllinien-Makrophagen mit Lipopolysaccharid behandelt, um Entzündungswege zu induzieren. Die Studie schlug vor, dass das Apolipoprotein A-1-Bindungsprotein Entzündungskaskaden verhindert, indem es an das Apolipoprotein A-1-Protein bindet.
- DHA schwächt die Aβ-induzierte Nekroptose über den RIPK1/RIPK3-Signalweg in THP-1-Monozyten ab. Diese Forschung schlug vor, dass Docosahexaensäure (DHA) die durch Amyloid-Beta-Protein induzierte Nekroptose in THP-1-Monozyten im Zusammenhang mit der Alzheimer-Krankheit hemmt
- Tumorfördernde Effekte von Exosomen aus Bauchspeicheldrüsenkrebszellen auf THP-1-Makrophagen: In dieser Publikation beobachteten Linton und Kollegen die krebsfördernde Wirkung von Exosomen, die von Adenokarzinomzellen des Pankreasganges abgesondert werden, auf Makrophagen, die von THP-1-Zelllinien stammen.
- Die Auswirkungen der Mülltrennung auf das Umweltmikrobiom, die Lebensfähigkeit der THP-1-Zellen und die Entzündungsreaktionen: In dieser Studie wurden Makrophagen aus der THP-1-Zelllinie verwendet und die Auswirkungen des in der Müllsortierindustrie vorhandenen Mikrobioms auf die Sekretion pro-inflammatorischer Zytokine durch diese Zellen untersucht.
- Standardisierte Protokolle für die Differenzierung von THP-1-Zellen zu Makrophagen mit unterschiedlichen M (IFNγ+ LPS), M (IL-4) und M (IL-10) Phänotypen: In dieser Studie wurden Protokolle für die Induktion der Differenzierung von THP-1-Zellen und die Entwicklung von Makrophagen mit bestimmten Phänotypen beschrieben.
- Diepro-atherogene Proteoglykanase ADAMTS-1 wird durch Laurinsäure über PI3K- und JNK-Signalwege in THP-1-Makrophagen herunterreguliert. Diese Arbeit wurde 2019 in Molecular Biology Reports veröffentlicht. Diese Studie untersuchte das therapeutische Potenzial von Laurinsäure auf THP-1-Makrophagen. Die Ergebnisse zeigten, dass Laurinsäure die Atherosklerose-Plaque stabilisiert und die Thrombose hemmt, indem sie die Expression von ADAMS-1 (pro-atherogene Proteoglykanase) moduliert.
Ressourcen für die THP-1-Zelllinie
In diesem Abschnitt werden alle verfügbaren Online-Ressourcen zu THP-1-Zellen behandelt. Dies wird Ihnen das Erlernen von Kultivierungs-, Differenzierungs- und Transfektionsprotokollen erheblich erleichtern.
Zellkultur-Protokolle
Hier finden Sie einige Ressourcen, die die Kultivierungs- und Handhabungsprotokolle für THP-1-Zellen erklären.
- Kultivierungs- und Differenzierungsprotokoll: Dieses Dokument enthält detaillierte und umfassende Informationen über Zellkulturmedien, Subkultivierung, Einfrieren und Auftauen sowie Differenzierungsprotokolle für diese Zellen.
- Subkultivierung von THP-1-Zellen: Dieses Dokument enthält ein Subkultivierungsprotokoll für THP-1-Zellen.
Transfektionsprotokolle
- Transfektion von THP-1-Zellen: In diesem Link geht es um die Transfektion von THP-1-Zellen mit Plasmid-DNA.
- Dieses Dokument beschreibt ein Transfektionsprotokoll für THP-1-Zellen.
Videos zu THP-1-Zellen
THP-1 ist eine häufig gezüchtete Zelllinie. Es sind zahlreiche Videos verfügbar, die die Handhabung und Kultivierung dieser Zelllinie erklären:
- THP-1-Zellen kultivieren: In diesem Video geht es um die Kultivierung von THP-1-Zellen.
- Transfektion der THP-1-Zelllinie: Dieses Video zeigt ein Protokoll für eine hocheffiziente Transfektion von THP-1-Zellen.
Wir hoffen, dass dieser Artikel angemessene Informationen über die Kultivierung von THP-1-Zellen, ihre Differenzierung, ihre Vorteile und ihre Anwendung in der Forschung enthält. Wenn Sie vorhaben, dieses In-vitro-Zellmodell der akuten myeloischen Leukämie in Ihrer Forschung zu verwenden, sollten Sie eine Bestellung bei uns in Betracht ziehen.
FAQs für die THP-1-Zelllinie
THP-1-Zellen sind eine menschliche monozytäre Zelllinie, die von einem Patienten mit akuter monozytärer Leukämie stammt. Sie werden in der Forschung häufig zur Untersuchung der Funktionen von Monozyten/Makrophagen, der Mechanismen von Immunität und Entzündung sowie der monozytären Leukämie eingesetzt.
THP-1-Makrophagen sind differenzierte Formen von THP-1-Monozyten. Wenn sie mit bestimmten Wirkstoffen wie Phorbol 12-Myristat 13-Acetat (PMA) behandelt werden, differenzieren sich THP-1-Zellen in Makrophagen, was sie zu einem nützlichen Modell für die Untersuchung der Biologie und Funktion von Makrophagen macht.
In der Forschung werden THP-1-Zellen verwendet, um verschiedene Aspekte der Monozyten-/Makrophagenbiologie zu untersuchen, darunter Differenzierung, Aktivierung, Reaktion auf Infektionen und die Rolle der Makrophagen bei Krankheitsprozessen wie Krebs und Entzündungen.
Quellenangaben
- Chanput, W., J.J. Mes, und H.J. Wichers, THP-1 cell line: an in vitro cell model for immune modulation approach. International immunopharmacology, 2014. 23(1): p. 37-45.
- Chanput, W., V. Peters, und H. Wichers, THP-1 and U937 Cells. The Impact of Food Bioactives on Health: in vitro and ex vivo models, 2015: S. 147-159.
- Zhang, M., et al., Apolipoprotein A-1 binding protein inhibits inflammatory signaling pathways by binding to apolipoprotein A-1 in THP-1 macrophages. Circulation Journal, 2018. 82(5): p. 1396-1404.
- Yuan, S., et al., DHA dämpft die Aβ-induzierte Nekroptose durch den RIPK1/RIPK3-Signalweg in THP-1-Monozyten. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2020. 126: p. 110102.
- Linton, S.S., et al., Tumorfördernde Effekte von Pankreaskrebszell-Exosomen auf THP-1-abgeleitete Makrophagen. PLoS One, 2018. 13(11): p. e0206759.